斜面菌種保藏法是簡便、普遍的保藏方法。具體做法是:將菌種在適宜的斜面培養基上培養成熟后,移入4~6℃的低溫下保藏,以后每隔3~5個月轉管一次。這個方法適用于所有的食用菌菌種,但草菇菌種的貯藏溫度需要提高到10~13℃,不然需在草菇菌落表面灌進3~4毫升10%甘油,起防凍作用。
斜面菌種保藏法應注意以下幾點:
第一,要選配好合適的培養基,一般要求培養基含有較豐富的有機氮,而盡可能降低糖的含量(一般不宜超過2%),既滿足菌絲生長的需要,又能防止產酸過多,以保持菌種的優良性狀。天然培養基比合成培養基更適用于菌種保藏。保種的培養基好能添加緩沖劑。
第二,保藏的菌種要移植在新配制瓊脂斜面上,并在適溫下培養至菌絲在整個斜面基本長滿,入藏的菌種培養時間不可太長,以免降低菌種生活力和保藏時間。
第三,保藏期間切勿使棉塞受潮,并定期檢查有無雜菌污染現象,培養基是否失水干縮。
第四,菌種的試管口用玻璃紙、塑料薄膜或防潮紙包扎,或用石蠟封閉,以防止培養基內水分過快蒸發。某些菌種(如革菌、多孔菌)試管要用黑色紙包裹后避光保藏,以免在光刺激下菌絲革質化,影響轉管。
第五,存放在冰箱內的菌種不可過分擁擠。溫度要控制在4℃左右,不宜過高過低。溫度過低,培養基結冰脫水,菌絲容易衰老死亡;溫度過高,會加快代謝過程,影響保藏期限。
第六,保藏菌種在使用前要置于適當溫度下,使其活化,再行轉管擴大培養。專管移植培養基應采用原來的培養基。